內毒素在細胞內的解毒和清除中的內化案例介紹（一）

Hampton等用巨噬細胞系RAW264.7細胞株研究LPS的內化過(guò)程。他們先將LPS加入培養基，使培養基內毒素濃度在納摩爾每升水平，然后加入RAW264.7細胞使其吸收4'-單磷酸脂質(zhì)AⅣA。在細胞攝取脂質(zhì)AⅣA的同時(shí)伴隨著(zhù)溶酶體發(fā)生去磷酸化反應，產(chǎn)生4'單磷酸脂質(zhì)AⅣA。后者的生物學(xué)活性顯著(zhù)降低，該實(shí)驗證實(shí)了LPS進(jìn)行去磷酸化反應的分解代謝促使其毒性下降?？梢?jiàn)，在溶酶體中發(fā)生LPS的解毒效應有兩種：①發(fā)生脫?；?。②發(fā)生去磷酸化。失去一定成分的LPS無(wú)法引出信號轉導效應，所以機體通過(guò)對LPS進(jìn)行酶解使其失去毒性。

細菌LPS進(jìn)入單核細胞可通過(guò)CD14依賴(lài)的途徑，存在有兩種方式，但大多數通過(guò)非網(wǎng)格蛋白參與的形式來(lái)完成。CD14結合LPS可以通過(guò)網(wǎng)格蛋白包被小窩（clathrin-coated pits）進(jìn)入細胞內，也可以如同其他GPI錨定蛋白一樣以非包被內陷（uncoatedinvagination）形式完成內化反應。進(jìn)入酸性的細胞內腔室后，脂質(zhì)A部分被分解，失去其生物學(xué)活性。用染色標記技術(shù)證實(shí)，LPS可以由吞噬細胞將其從細胞膜上轉運到細胞內小泡內，表現出多種特性。在巨噬細胞中，LPS可以到達核周區域，該區為高爾基體停泊處。

許多證據顯示：內化的LPS需經(jīng)歷酶學(xué)分解和物理隔離（physical sequestration）兩個(gè)處理過(guò)程，這些過(guò)程可以削弱LPS的信號轉導作用。LPS誘導的信號轉導效應本身可以調節其加工過(guò)程，例如LPS激活的巨噬細胞中LPS可以下調自身的去磷酸化反應。在LPS 反應低下的C3H/HeJ品系小鼠中，Thieblemont 等發(fā)現巨噬細胞對LPS和神經(jīng)酰胺的內吞攝取能力存在缺陷。

一些實(shí)驗顯示，在LPS信號轉導之前，LPS必須存在于細胞內小泡中，而其他實(shí)驗則認為LPS經(jīng)歷內化不涉及信號轉導，這種分歧的產(chǎn)生可能是由于未充分考慮到所用的干擾細胞活動(dòng)的試劑對細胞的其他生物學(xué)功能所帶來(lái)的負面影響。如腺嘌呤受體2X7（purinergic receptor 2X7，2X7）在LPS的激活效應中起著(zhù)基本的作用，不能排除上述實(shí)驗中應用的試劑對2X7存在一定影響。