TLRs的種屬特異性表達調控：各TLRs的差異性研究

內毒素耐受現象指的是在脂多糖（LPS）的初始刺激后，機體或細胞對隨后同類(lèi)刺激的響應能力顯著(zhù)降低的狀態(tài)。這一現象中，Toll樣受體（TLR）作為關(guān)鍵分子，積極參與了LPS信號的跨膜傳遞過(guò)程。TLRs介導的信號轉導通路在內毒素耐受機制中扮演著(zhù)核心角色，通過(guò)調控信號傳導蛋白及下游細胞因子的結構變化與功能活性，進(jìn)而抑制了炎性因子的過(guò)量釋放。

目前TLRs的研究主要集中在與配體相互作用及其信號轉導方面，對其基因的轉錄調控研究尚報道較少。近年來(lái)，一些研究觀(guān)察了人或小鼠組織或離體細胞內TLRs轉錄體的基礎和誘導表達，以及人和小鼠天然免疫細胞內調控TLR基因轉錄的細胞特異性和誘生性的基因調控元件，結果顯示，TLRs調節方面存在種屬特異性差異。

（一）TLR2的表達調控

雖然TLR2是革蘭陽(yáng)性細菌及其產(chǎn)物的主要受體，但是細菌LPS刺激能增加小鼠RAW264.7巨噬細胞和人單核細胞內TLR2基因表達。多粘菌素B預處理能抑制LPS上調豬外周血單核細胞TLR2 mRNA表達的作用。此外，高濃度LPS和合成脂質(zhì)A仍能上調TLR4缺陷C3H/HeJ小鼠腹腔巨噬細胞內TLR2 mRNA的表達，提示TLR2雖然不是LPS的主要受體，但是LPS能上調TLR2表達，其作用不依賴(lài)于TLR4。

人和小鼠TLR2的表達存在幾個(gè)方面的差異，明顯的是，小鼠胸腺和T細胞存在TLR2，而在人卻無(wú)。此外，小鼠白細胞內TLR2 mRNA表達很低或不能測出，促炎細胞因子、細菌LPS能誘導其顯著(zhù)表達。但在人類(lèi)，外周血白細胞內存在較高水平的TLRZ結構性表達。人單核細胞TLR2 mRNA在細胞黏附到組織培養板后可見(jiàn)表達上調，但在短期的細菌產(chǎn)物刺激后未見(jiàn)表達增加。人巨噬細胞或巨噬細胞系受到刺激后，無(wú)明顯的TLR2 mRNA表達增加。LPS還可誘導靜息下不表達TLR2的人血管內皮表達TLR2。人和小鼠5′上游序列或5′非翻譯區無(wú)明顯的同源性。

（二）TLR3的表達調控

研究顯示，在人白細胞中，僅在樹(shù)突細胞內檢測到TLR3轉錄體，其他白細胞（如單核細胞、粒細胞、NK細胞、T細胞和B細胞）和巨噬細胞內均未檢測到TLR3。但在小鼠，巨噬細胞內有TLR3表達，并在LPS刺激后表達明顯增加?？寺∪撕托∈骉LR3轉錄體的5全段，觀(guān)察TLR3基因的近端啟動(dòng)子區。有趣的是，人和鼠TLR3基因也似乎利用不同的近端調控區，控制TLR3表達。兩者的近端調控區的序列完-全不同。

（三）TLR4的表達調控

表達TLR4的細胞主要為骨髓源性細胞，如單核細胞、巨噬細胞、樹(shù)突細胞和粒細胞，TLR4基因的近端啟動(dòng)子在人和小鼠間存在高度結構同源性，含有骨髓特異性基因的典型特征，如無(wú) TATA盒、存在幾個(gè)富含嘌呤的序列，該序列是被轉錄因子PU.1識別的。

人組織內，脾和外周血白細胞內TLR4表達最-強，大多數其他組織呈弱表達，肝內TLR4表達檢測不出。在小鼠，肺、心和脾內TLR4表達最-強，其次，骨骼肌、肝和腎也呈強表達，說(shuō)明盡管存在同源啟動(dòng)子區，但基礎組織表達水平不同。此外，人和小鼠TLR4基因在進(jìn)化中獲得不同的外顯子，理論上，兩種外顯子誘導一個(gè)早期終止密碼子，在人和小鼠細胞內可能導致非功能性或很短的肽鏈。有趣的是，TLR4轉錄體表達水平在其主要激動(dòng)劑LPS刺激后呈不同變化：人單核細胞或巨噬細胞TLR4表達增加，小鼠巨噬細胞TLR4呈下調表達。

Poltorak等進(jìn)一步觀(guān)察了不同結構LPS（LPS、類(lèi)脂A及四?；?lèi)脂A）刺激對人、小鼠TLR4表達細胞的影響，發(fā)現上述三種刺激物均能刺激小鼠TLR4表達細胞的反應，而人TLR4表達細胞僅對LPS和類(lèi)脂A反應，對四?；?lèi)脂A無(wú)反應，提示：TLR4的識別作用與其結構有一定的內在聯(lián)系。實(shí)際上，人和小鼠TLR4胞外段的同源性?xún)H為53%，可能正因為這種結構上的差異使不同種屬TLR4對配體的識別作用也存在明顯的差異。

（四）其他TLRs的表達

有關(guān)其他TLRs的表達和調控的報道甚少。除TLR2、TLR3和TLR4外，其他TLR基因轉錄起始位點(diǎn)和近端啟動(dòng)子區均未明確。已有的資料尚不足以進(jìn)行小鼠與人基因表達差異的比較分析最近有研究報道，人TLR9主要發(fā)現在漿細胞樣DCs和B細胞，小鼠TLR9主要表達在B細胞、巨噬細胞和骨髓源性DCs，TLR9的調控序列可能在進(jìn)化中也發(fā)生變化。LPS、IFNγ、IL-1、1L-6和TNFa均不引起TLR6 mRNA表達。