清道夫受體SR-A在天然免疫中的作用及其機制探討

雖然大量研究證實(shí)，SR在介導動(dòng)脈粥樣硬化形成中發(fā)揮至關(guān)重要的作用，近年來(lái)越來(lái)越多的研究也顯示，巨噬細胞表面SR-A也是天然免疫系統中的重要受體分子，與宿主防御功能密切相關(guān)，主要表現為：

（一）結合病原菌及其毒素

研究表明，細菌LPS及其類(lèi)似物ReLPS和Lipid 1VA都能與ac-LDL或ox-LDL競爭結合SR，ac-LDL或ox-LDL能減少血循環(huán)中LPS的清除?？扇苄耘R-A能直接識別多種革蘭陽(yáng)性細菌，如釀膿鏈球菌、金黃色葡萄球菌、單核細胞增多性李斯特菌，其結合作用能被LTA抑制，說(shuō)明SR結合完整的細菌至少部分是由LTA介導的。

SR-A對細菌及其內、外毒素的結合不依賴(lài)于血清或脂多糖結合蛋白。上述結果說(shuō)明SR-A具有模式識別分子的結合特征。體內SR-A的表達分布顯示，SR-A在肝枯否細胞﹑肺泡巨噬細胞、腸道固有層巨噬細胞呈高表達，脾臟紅髓和邊緣區巨噬細胞、胸腺髓質(zhì)和淋巴結包膜下區的巨噬細胞呈低表達。在成年小鼠大腦，SR-A主要分布于脈絡(luò )膜叢的巨噬細胞和腦脊膜的巨噬細胞上。小膠質(zhì)細胞不表達SR-A受體。海馬內注射LPS后24h，可檢測出SR-A在小膠質(zhì)細胞上的表達。SR-A主要在巨噬細胞表面的分布特征也進(jìn)一步說(shuō)明了SR-A在細胞防御中的重要作用，因為巨噬細胞具有強吞噬特性和免疫監視作用。

（二）吞噬作用與抗原提呈作用

對微生物的吞噬作用是宿主抵抗細菌感染的關(guān)鍵因素。其機制主要有兩個(gè)方面：調理素依賴(lài)性和調理素非依賴(lài)性吞噬作用。在調理素依賴(lài)性吞噬作用中，免疫球蛋白或補體分子結合微生物，隨后通過(guò)吞白細胞上的Fc或補體受體促進(jìn)微生物攝入。在調理素非依賴(lài)性吞噬作用中，微生物表面上的配體分子則直接被吞噬細胞漿膜上的模式識別受體識別。

關(guān)于SR-A對巨噬細胞吞噬活性的介導作用，首先觀(guān)察其對凋亡胸腺細胞的攝入。研究顯示，抗小鼠SR-A抗體2F8能抑制胸腺巨噬細胞和腹腔巨噬細胞對凋亡胸腺細胞的攝入，使其攝取量減少50%。SR-A-/-小鼠的胸腺巨噬細胞也顯示出對凋亡胸腺細胞攝入減少50%。將正常無(wú)吞噬作用的細胞表達SR-A，可使其具有攝入調亡細胞的能力。隨后研究也發(fā)現，SR-A也能介導巨噬細胞對細菌的吞噬作用。利用轉基因技術(shù)將SR-A基因轉入CHO或HEK293細胞內，細胞則能結合和攝入熒光標記的大腸桿菌和金黃色葡萄球菌。包被LPS或1TA的顆粒也能被轉染SR-A的CHO細胞結合和內移。

SR-A-/-小鼠腹腔巨噬細胞攝入細菌的量較野生型減少40%。說(shuō)明巨噬細胞表面SR-A是調控細胞吞噬功能的重要受體。SR-A對細胞吞噬功能的調控作用與多種因素有關(guān)，如調理素、巨噬細胞來(lái)源﹑激活狀態(tài)和培養條件。細菌株也是個(gè)重要的影響因素，如有莢膜大腸桿菌K1較無(wú)莢膜K12或DH5α菌株更易攝入。證明SR-A參與宿主防御作用最有力的證據是來(lái)源于SR-A-/-小鼠的體內研究。

研究顯示，SR-A-/-小鼠對單核細胞增多性利斯特細菌、DNA病毒感染的易感性明顯增加。雖然野生型和SR-A-/-小鼠均顯示快速從循環(huán)內清除單核細胞增多性利斯特菌，但是，在感染后24和96h，SR-A-/-小鼠肝、脾內細菌數明顯高于野生型。SR-A-/-小鼠對金黃色葡萄球菌腹腔內感染的易感性也明顯增加。盡管動(dòng)物中性粒細胞對金黃色葡萄球菌的殺滅作用正常，但動(dòng)物清除感染部位細菌的能力明顯下降，動(dòng)物最終死于彌漫性腹腔感染。另外，SR-A-/-小鼠較野生型更易發(fā)生內毒素休克。這說(shuō)明組織巨噬細胞表面SR-A在介導細菌吞噬﹑清除細菌及其毒素方面發(fā)揮了重要作用。

有研究顯示，巨噬細胞表面MARCO也具有結合革蘭陰性和革蘭陽(yáng)性細菌的能力，這種結合作用能被經(jīng)典的SR抑制劑或特異性抗MARCO抗體阻斷，但其介導細菌的吞噬作用尚待進(jìn)一步證明，因為CHO轉染體僅結合細菌，未見(jiàn)將細菌攝入到胞內。

（三）黏附作用

巨噬細胞能黏附到許多表面，而且不易從培養皿上脫落。與其他許多細胞系不同，有EDTA（二價(jià)離子螯合物，能阻斷整合素介導的黏附作用）存在時(shí)，巨噬細胞仍能黏附到塑料培養皿（tissue culture plastic，TCP）。Fraser等報道，在 EDTA和血清存在時(shí)，巨噬細胞與TCP的黏附作用能被抗SR-A單克隆抗體2F8阻斷。免疫熒光染色顯示，SR-A分布于黏附側的細胞膜上。此外，有研究顯示，SR-A能促使巨噬細胞黏附到被糖化（glycation）修飾的Ⅳ膠原包被的表面上。說(shuō)明SR-A參與介導巨噬細胞的黏附作用，這可能對于促進(jìn)巨噬細胞在感染部位的防御和免疫功能具有重要意義。

（四）下調炎癥反應

與LPS其他受體不同，SR-A與LPS結合后，迅速經(jīng)細胞的攝粒作用，將LPS內移到溶酶體內，經(jīng)脫磷酸和脫?；饔?，內毒素被降解和滅活，在此過(guò)程中并不引起巨噬細胞激活，如釋放TNFα等炎癥介質(zhì)。我們也研究發(fā)現，利用氧化型低密度脂蛋白或抗SR單抗預處理枯否細胞，能明顯增強LPS激活細胞的作用，抗CD14單抗則能明顯抑制氧化型低密度脂蛋白的增敏作用。用LPS刺激轉染SR-A的HEK293細胞也不引起胞內NF-κB活化。最近研究進(jìn)一步顯示，SR-A缺陷小鼠對LPS的敏感性明顯高于野生型，表現為動(dòng)物病死率、體內細胞因子水平，如TNFα、IL-6等明顯高于對照組。上述結果說(shuō)明，SR-A是一種重要的防御性受體，其對LPS的清除作用可能是機體防止感染時(shí)炎癥反應過(guò)度的重要內源性機制。

（五）啟動(dòng)獲得性免疫反應

除參與天然免疫作用外，SR-A也可能參與啟動(dòng)獲得性免疫反應。研究表明，SR介導的吞噬作用同時(shí)也引起特異性修飾抗原提呈給T細胞，使其分泌高水平的IFNY、產(chǎn)生低水平的IL-4和IL-10，提呈給B細胞，則產(chǎn)生拮抗病原菌或其毒素的特異性抗體。在動(dòng)脈粥樣斑塊內存在T細胞和特異性識別被修飾LDL表型的抗體。說(shuō)明SR-A也可能在獲得性免疫中發(fā)揮重要作用。