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關(guān)于鱟試驗法中假陽(yáng)性結果的解決方法

發(fā)布時(shí)間: 2022-11-11  點(diǎn)擊次數: 481次

樣品中混入細菌內毒素發(fā)生凝集,由形成凝膠的有無(wú)來(lái)檢測樣品中的內毒素,然而試劑除了內毒素反應外,它同時(shí)也會(huì )對內毒素以外的其他物質(zhì)存在凝集反應。因此,勢必會(huì )形成假陽(yáng)性或假陰性的實(shí)驗結果。這就是試驗法中的特異性問(wèn)題。

 

對于假陽(yáng)性結果的問(wèn)題,可以說(shuō)十分復雜。因為對于大多數樣品來(lái)說(shuō),主要都為假陰性情況較多,而對于假陽(yáng)性結果的判斷和排除是很困難的。當我們對一個(gè)樣品用試驗法檢測出陽(yáng)性結果時(shí),一可以說(shuō)是由于內毒素超過(guò)限值所引起,二也可以理解為假陽(yáng)性結果。因此我們在實(shí)驗時(shí)要特別注意區分。

 

 

在假陽(yáng)性結果的研究過(guò)程中,最-突出的是有關(guān)G因子反應系被激活所形成的凝膠化反應,即一般的試劑由于含有G因子也可被1,3-β-D-glucan葡聚糖所激活而使產(chǎn)生凝集反應,從而形成假陽(yáng)性結果。

關(guān)于1,3-β-D-glucan它是在1981年由Adinuma所發(fā)現一種抗癌藥,能使試劑產(chǎn)生凝固。國外報道該物質(zhì)在10ng/ml時(shí)就可使試劑凝固。根據我們的試驗發(fā)現不同廠(chǎng)家的試劑可在2.5 ~10ng/ml范圍內使試劑凝固。該物質(zhì)廣泛存在于擔子菌、真菌、地衣類(lèi)、酵母和藻類(lèi)的菌體成分中。另外,某些用人造纖維造的人工腎透析膜上也含有類(lèi)似物質(zhì),它可引起家兔升溫。

 

1,3-β-D-glucan對熱極為穩定。高壓121℃并不能使其滅活。需2502小時(shí)加熱滅菌才能使其滅活。因此,要想防止假陽(yáng)性結果的產(chǎn)生,必須要排除1,3-β-D-glucan,使其不能激活G因子而形成凝膠。

國外在80年代后對此進(jìn)行了許多的研究和改進(jìn)。目前已開(kāi)發(fā)出僅對內毒素起反應的專(zhuān)試劑。只與內毒素起反應的試劑有日本生化學(xué)工業(yè)株式會(huì )社生產(chǎn)的Endospecy,它是將東方裂解液中各組分提取后重組,重組時(shí)不加G因子,另一種是日本和光純藥株式會(huì )社生產(chǎn)的ES =,它是美洲裂解液中加大刃羧甲基curdaln封閉G因子。同時(shí)國外也開(kāi)發(fā)出只與1,3-β-D-glucan起反應的試劑由蠶中提取而來(lái)的新型的SLP試劑。和光以及日本化學(xué)工業(yè)株式會(huì )社生產(chǎn)的Gluspecy。

 

對于大多數樣品來(lái)說(shuō),由于使用特異性試劑與非特異性試劑對其結果是沒(méi)有差異的。因此在一般情況下可以不必考慮,只有在確實(shí)認定有干擾時(shí),才考慮使用特異性試劑以排除干擾。

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