內毒素的檢測有傳統的家兔熱原試驗(rabbit pyrogentest,RT)、鱟試驗法(limulus test,LT)以及其他的一些特殊方法。
(一)家兔熱原試驗法
此方法即將一定量的被檢標本靜脈注人家兔體內,觀(guān)察其注射后的發(fā)熱情況,以決定所檢標本中有無(wú)熱原存在。RT法為一種定性檢測內毒素的方法,應用歷史較久,此方法本身有許多限制,如家兔對內毒素在反應上有個(gè)體差異﹑敏感度不高、不能定量測出內毒素等。
(二)鱟試驗法
細菌內毒素檢查法也稱(chēng)之謂鱟試驗法(LT法)英文為Bacterial Endotoxins Test,它是在1964年由美國學(xué)者Levin和Bang所發(fā)現,并在1968年正式建立的一種定性或定量檢測微量細菌內毒素的分析方法。由于其靈敏度高,特異性強而且操作簡(jiǎn)便快捷,目前在許多科研和應用單位均得到了突飛猛進(jìn)的發(fā)展和推廣應用。自此方法建立以來(lái)的30年間,其在細菌內毒素本質(zhì)和方法學(xué)的研究方面更是不斷進(jìn)步和發(fā)展,加之各種新型試劑和新型儀器的開(kāi)發(fā),不僅在藥學(xué),而且在微生物學(xué)及臨床檢驗等領(lǐng)域的開(kāi)發(fā)應用更為廣泛。
LT法又稱(chēng)鱟變形細胞溶解物試驗(limulus amoebocytelysate,LAL),是目前檢測內毒素最敏感的方法。它比RT法敏感10~100倍以上,可測出微量的內毒素(0.1 ~ 1ng/ml),用微量光電法及其他改進(jìn)方法可測到微微克(pg/ml)的水平。而在RT法中,敏感性高的家兔需注射1.5ng/kg 才能引起發(fā)熱,而敏感性低的卻需要注射0.5 ~10μg/kg才能引起發(fā)熱。
LT法可廣泛地用于革蘭氏陰性菌感染的快速診斷,對患者的血液、尿液及腦脊液可進(jìn)行直接的檢查。此法亦可用于檢查各種注射劑內是否有內毒素污染。