<sup id="smg8u"><wbr id="smg8u"></wbr></sup><acronym id="smg8u"><noscript id="smg8u"></noscript></acronym>
<samp id="smg8u"></samp>
<tr id="smg8u"><center id="smg8u"></center></tr>
<sup id="smg8u"><wbr id="smg8u"></wbr></sup>
<tt id="smg8u"></tt> <sup id="smg8u"><tr id="smg8u"></tr></sup>
<object id="smg8u"></object>
<rt id="smg8u"><div id="smg8u"></div></rt><sup id="smg8u"><noscript id="smg8u"></noscript></sup>
<object id="smg8u"><option id="smg8u"></option></object><sup id="smg8u"><wbr id="smg8u"></wbr></sup>
<object id="smg8u"></object>
<acronym id="smg8u"><noscript id="smg8u"></noscript></acronym>
熱門(mén)搜索:鱟試劑,內毒素檢測儀,內毒素檢測試劑盒,基因重組鱟試劑,濁度法鱟試劑,顯色法鱟試劑,凝膠法鱟試劑,葡聚糖緩沖液,無(wú)熱原水,鱟試劑耗材
技術(shù)文章 / article 您的位置:網(wǎng)站首頁(yè) > 技術(shù)文章 > 精準選擇 助推高效 | PSNG—基因重組鱟試劑領(lǐng)域的重磅出擊

精準選擇 助推高效 | PSNG—基因重組鱟試劑領(lǐng)域的重磅出擊

發(fā)布時(shí)間: 2022-03-23  點(diǎn)擊次數: 1151次

在制藥過(guò)程中,細菌內毒素的檢測依賴(lài)于鱟血資源。隨著(zhù)注射劑、疫苗類(lèi)、化學(xué)藥品類(lèi)等制劑品的需求不斷增長(cháng),鱟血資源的使用率越來(lái)越高;同時(shí),鱟試劑中含有B因子、C因子、G因子、凝固酶原,存在由1,3-β-D-葡聚糖激活G因子導致的假陽(yáng)性結果。所以,建立一套不依賴(lài)鱟生物進(jìn)行細菌內毒素檢測的快捷、高效的補充替代方法尤為重要。


鱟


作為新型的重組鱟試劑檢測方法:PSNG、rFC則備受關(guān)注。


一、PSNG和rFC的概念


01 PSNG


PSNG(基因重組鱟試劑)是一種基因工程技術(shù)合成的細菌內毒素定量檢測試劑,該試劑不依賴(lài)鱟血資源,滿(mǎn)足可持續發(fā)展的目標。


基因重組鱟試劑


基因重組鱟試劑


它*模擬了天然鱟試劑LAL的酶聯(lián)反應,包含C因子、B因子、凝固酶原,一種擁有與傳統鱟試劑相同酶聯(lián)反應,同時(shí)又消除了與1,3-β-D-葡聚糖交叉反應造成假陽(yáng)性結果的內毒素檢測試劑。


4971303590a06b8a8bb08aadd4d12b7b__url=http%3A%2F%2Fdingyue.ws.126.net%2F2022%2F0322%2F53b41190j00r94hmp001dc000sg00g0m.jpg&thumbnail=660x2147483647&quality=80&type=jpg.jpg

PSNG(上圖右側)成功去除了天然鱟試劑(上圖左側)的G因子干擾。


02 rFC


重組C因子法rFC)是通過(guò)體外重組鱟凝血級聯(lián)反應的第一個(gè)組分:C因子,激活的C因子直接剪切一個(gè)熒光底物,產(chǎn)生的信號被熒光酶標儀識別。相較于傳統的動(dòng)態(tài)LAL法,重組C因子法只有一種反應機制。


710a16499617ee0829360cadeb30c143__url=http%3A%2F%2Fdingyue.ws.126.net%2F2022%2F0322%2F873fb7cbj00r94hmp001ac000qi00ftm.jpg&thumbnail=660x2147483647&quality=80&type=jpg.jpg

反應機制:左側為基因重組鱟試劑 右側為重組C因子試劑


二、LAL、PSNG、rFC對比情況


作為新型的重組鱟試劑PSNG、rFC,與傳統的鱟試劑LAL進(jìn)行細菌內毒素檢測時(shí)又會(huì )有什么不同呢?


01 PSNG與LAL在檢測內毒素上比較

e6954c17066ae90ff24552c2cdb37135__url=http%3A%2F%2Fdingyue.ws.126.net%2F2022%2F0322%2Fde465b7cj00r94hmp001ec000sg009wm.jpg&thumbnail=660x2147483647&quality=80&type=jpg.jpg

(圖1)

由圖1所示,通過(guò)研究在顯色底物存在下,使用三種重組酶原的多種組合,確定三種重組酶原是否能重建反應步驟。


結果證實(shí),當三種重組酶原同時(shí)存在時(shí),內毒素才能激活蛋白酶活性,得出了PSNG與LAL在檢測內毒素上具有等效性。另外,研究證實(shí)了,三種重組酶原的蛋白酶活性大大增強,信號放大。


02 LAL、PSNG、rFC對內毒素敏感度比較


f5d7106d4377fc3aa399afb44dc9f97f__url=http%3A%2F%2Fdingyue.ws.126.net%2F2022%2F0322%2Ff0c71bb2j00r94hmp0042c000md00c9m.jpg&thumbnail=660x2147483647&quality=80&type=jpg.jpg

(圖2)


從反應機制上看,rFC缺少了級聯(lián)放大的兩個(gè)環(huán)節(加速反應),只能通過(guò)熒光檢測人為放大(減少了來(lái)源于自然反應的特異性)。


如圖2所示,凝血酶的活化是LAL信號放大的主要驅動(dòng)力;B因子的活化是針對內毒素的特異性活化,由此可以得出,PSNG(rCR)敏感度比rFC更高。


03 PSNG與LAL檢測時(shí)間比較


78b747afd01298e804e2cfad90390267__url=http%3A%2F%2Fdingyue.ws.126.net%2F2022%2F0322%2Fe560c122j00r94hmp002tc000fm00bbm.jpg&thumbnail=660x2147483647&quality=80&type=jpg.jpg

(圖3)


如圖3所示,通過(guò)對一系列濃度RSE(細菌內毒素參考標準品)應用PyroSmart NextGen™(PSNG)和典型動(dòng)態(tài)顯色試劑檢測得到的起始時(shí)間值,得出PyroSmart NextGen™較典型的動(dòng)態(tài)顯色試劑檢測縮短了大約一半的時(shí)間。


04 PSNG與LAL批間一致性比較

19608daa831343622187cd034db2a65d__url=http%3A%2F%2Fdingyue.ws.126.net%2F2022%2F0322%2F77d365e6j00r94hmp0017c000fw009ym.jpg&thumbnail=660x2147483647&quality=80&type=jpg.jpg

(圖4)


天然來(lái)源的LAL試劑具有固定的批次間變異性,而PyroSmart NextGen™試劑表現出批次間的一致性。圖4所示,六個(gè)單獨批次的PyroSmart NextGen™試劑的曲線(xiàn)標準趨于一致,證明PSNG具有重復性和可預測性的性能。


05 PSNG與LAL對內毒素特異性比較


07a0f0451ca493ec59d60411bdc0d95d__url=http%3A%2F%2Fdingyue.ws.126.net%2F2022%2F0322%2Fa427633cj00r94hmp0016c000hm00a0m.jpg&thumbnail=660x2147483647&quality=80&type=jpg.jpg

(圖5)


圖5的X-Y軸分別表示的是加標/不加標1,3-β-D葡聚糖的各批次PyroSmart NextGen™和系列標準濃度的反應。結果顯示了添加1,3-β-D葡聚糖對應用PyroSmart NextGen™對內毒素的檢測不存在干擾,各批次間相關(guān)性良好。


06 PSNG驗證性能


d7dd290c33778e9f538506862cc90453__url=http%3A%2F%2Fdingyue.ws.126.net%2F2022%2F0322%2F022cf07dj00r94hmp0020c000f1008am.jpg&thumbnail=660x2147483647&quality=80&type=jpg.jpg

(圖6)

02cd783efe6ed56a5edccb5483499384__url=http%3A%2F%2Fdingyue.ws.126.net%2F2022%2F0322%2F9b848d8fj00r94hmp001pc000ej006ym.jpg&thumbnail=660x2147483647&quality=80&type=jpg.jpg

(圖7)


如圖6、圖7所示,應用PyroSmart NextGen™在50-0.005 EU/mL內毒素范圍內,在兩批次、四個(gè)分析人員、三天內條件下,執行了24個(gè)性能驗證實(shí)驗。依據ICH Q2指南標準,結果顯示各驗證參數滿(mǎn)足標準要求。


07 PSNG、rFC、LAL針對檢測樣品的比較


e3c5a2df76235e4134ef456772614b54__url=http%3A%2F%2Fdingyue.ws.126.net%2F2022%2F0322%2F0018388cj00r94hwc0023c000dy00fvm.jpg&thumbnail=660x2147483647&quality=80&type=jpg.jpg


(圖8)

f576c3e5fd2ae95225200d56bed02b7b__url=http%3A%2F%2Fdingyue.ws.126.net%2F2022%2F0322%2F6b60611aj00r94hmp003pc000ki00acm.jpg&thumbnail=660x2147483647&quality=80&type=jpg.jpg

(圖9)

39f7b9a259ca5b06ffad556f3b297394__url=http%3A%2F%2Fdingyue.ws.126.net%2F2022%2F0322%2F238d4bafj00r94hmp004fc000lg00b8m.jpg&thumbnail=660x2147483647&quality=80&type=jpg.jpg



(圖10)


圖8、圖9、圖10所示,適合性/一致性研究測試了多個(gè)成品、水、緩沖液等樣品,得出PyroSmart NextGen™較 LAL具有相等或較低的不干擾稀釋倍數(NID)。另外,Muroi 等人報告了使用PyroSmart NextGen™前身 PyroSmart 試劑檢測藥典118種腸外注射藥物得出了相似的結果。


基于以上數據得出結論,重組鱟試劑方法(rCR)適合于廣泛的產(chǎn)品檢測??杀刃匝芯繙y試了多種來(lái)源的細菌內毒素和水樣,證實(shí)應用PyroSmart NextGen™檢測具有較好的相對回收率。


08 PSNG、LAL、rFC方法對比


a2e89a5ceed3dad5c895bc65cabb02cd__url=http%3A%2F%2Fdingyue.ws.126.net%2F2022%2F0322%2F46c947e3j00r94hmp005hc000sf00dqm.jpg&thumbnail=660x2147483647&quality=80&type=jpg.jpg

(圖11)


如圖11 所示,PSNG優(yōu)于重組C因子法。PSNG檢測過(guò)程不需要更換方法和設備,就能繼續同樣的工作流程。


三、總結


從LAL、PSNG、rFC對比情況來(lái)看,PyroSmart NextGen™較rFC、LAL在細菌內毒素檢測上具有較強的優(yōu)勢:



相比重組C因子內毒素檢測方法,PyroSmart NextGen™內毒素檢測試劑可以產(chǎn)生級聯(lián)放大反應,使得內毒素檢測更加高效和靈敏。


文章參考來(lái)源:PYROSMART NEXTGEN RECOMBINANT LAL REAGENT



  • 聯(lián)系電話(huà)電話(huà)400-687-1881
  • 傳真傳真010-87875015
  • 郵箱郵箱f.he@bio-life.com
  • 地址公司地址北京市大興區中關(guān)村科技園區大興生物醫藥產(chǎn)業(yè)基地華佗路50號院18幢樓2層
  • 公眾號二維碼
© 2024 版權所有:科德角國際生物醫學(xué)科技(北京)有限公司(www.nathanielgmoore.net)   備案號:京ICP備2021012680號-1   網(wǎng)站地圖   技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng)       

聯(lián)


<sup id="smg8u"><wbr id="smg8u"></wbr></sup><acronym id="smg8u"><noscript id="smg8u"></noscript></acronym>
<samp id="smg8u"></samp>
<tr id="smg8u"><center id="smg8u"></center></tr>
<sup id="smg8u"><wbr id="smg8u"></wbr></sup>
<tt id="smg8u"></tt> <sup id="smg8u"><tr id="smg8u"></tr></sup>
<object id="smg8u"></object>
<rt id="smg8u"><div id="smg8u"></div></rt><sup id="smg8u"><noscript id="smg8u"></noscript></sup>
<object id="smg8u"><option id="smg8u"></option></object><sup id="smg8u"><wbr id="smg8u"></wbr></sup>
<object id="smg8u"></object>
<acronym id="smg8u"><noscript id="smg8u"></noscript></acronym>
友谊县| 盐城市| 赤峰市| 玉溪市| 望奎县| 甘孜县| 屏南县| 彭泽县| 盱眙县| 易门县| 平阴县| 区。| 星子县| 长子县| 张掖市| 青岛市| 兰州市| 瑞昌市| 江门市| 宁晋县| 宜川县| 五台县| 开封市| 图片| 临夏市| 丰顺县| 宿迁市| 精河县| 巩义市| 宁海县| 永寿县| 普兰店市| 大足县| 马尔康县| 贵州省| 社会| 阳泉市| 富蕴县| 常熟市| 巴中市| 龙里县| http://444 http://444 http://444 http://444 http://444 http://444